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導(dǎo)致基因探針法PCR試劑盒變質(zhì)的原因及使用注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):1298 更新時(shí)間:2021-01-20
  基因探針法PCR試劑盒變質(zhì)了就沒辦法使用了,因?yàn)樗鼤?huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)論。那具體是哪些原因會(huì)導(dǎo)致它變質(zhì)呢?下面請聽聽的講述。
  1、試劑因素
  不同批次的產(chǎn)品在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過批檢的項(xiàng)目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
  2、樣本因素
  標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
  3、操作因素
  操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
  在使用基因探針法PCR試劑盒的過程中應(yīng)注意些什么呢?
  1、PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行,設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
  2、純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有很影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
  3、所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
  4、PCR試劑配制應(yīng)使用高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
  5、PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
  6、試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
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